化学发光免疫法与放射免疫法检测AFP的比较

日期：2013-08-15

罗炜（广州呼吸病研究所）   
王慧　陈柏铭（广州医学院第一附属医院检验科）  

      摘要　本文采用放射免疫法和化学发光免疫法平行测定60例临床送检血清标本的甲胎蛋白(AFP)含量，结果表明两法的相关性良好(r＝0.995)，但化学发光免疫法的精密度和准确性均优于放射免疫法。   

     关键词　化学发光免疫法　放射免疫法　甲胎蛋白   

     临床检测血清AFP常规多采用放射免疫法，而近年发展起来的化学发光免疫法因其快速、精确、重现性好及试剂安全无毒的特点，显示出很好的应用前景［1］。为进一步了解化学发光免疫法的特点，本文报告用放射免疫法和化学发光免疫法对比检测60例临床血清标本中AFP的含量，并对结果进行统计分析和比较。  

       材料和方法  

       一、标本　随机抽取60例临床送检血清标本。   

       二、仪器和方法　放射免疫法使用上海的SN-682型γ计数仪，中国原子能科学研究所的AFP试剂盒。化学发光免疫法使用美国Chiron公司的ACS180全自动化学发光仪和配套试剂盒。其测定原理为以吖啶酯作为发光底物，采用双抗体夹心模式［2］，即标本中的AFP抗原与固相中的单克隆AFP抗体结合，再与液相中以吖啶酯标记的多克隆AFP抗体结合。因待测AFP抗原总量与仪器测得的发光单位量(RLUs)存在正比的关系，由此求出AFP的含量。  

       结　　果   

       一、线性实验　将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验，结果显示放射免疫法和化学发光免疫法分别在5～400 ng/ml和2～940 ng/ml范围内呈良好的线性关系。  

       二、对比实验　用上述两法同时对受检血清标本进行定量分析。结果表明，两法无显著差异(P＞0.05)，相关系数r＝0.995，直线回归方程Y＝-1.058+0.920X，提示两法呈良好相关性。   

      三、回收实验　取不同浓度的混合血清(AFP浓度为18.6，26.7，35.3 ng/ml)，分别加入不同浓度的定值血清，用放射免疫法和化学发光免疫法测得的回收率分别为90.2～109.0%和91.0～107.3%，平均回收率为95.7%和96.4%。   

      四、精密度实验　用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验。附表中的结果表明化学发光免疫法的重复性较好。  

附表　两法的精密度对比   

　 批内CV% 批间CV%   

放射免疫法 化学发光免疫法 放射免疫法 化学发光免疫法   
低值 5.27 3.20 6.55 3.40   
中值 5.00 2.48 5.30 3.31   
高值 4.50 3.50 5.38 4.71  

      讨　　论   

      化学发光免疫技术既具有发光检测的高度敏感性，又具有免疫分析的高度特异性［3］。本文检测AFP结果提示放射免疫法和化学发光免疫法之间无显著差异(P＞0.05)，相关性好(r＝0.995)。显示化学发光免疫法在敏感性、特异性方面不仅可与放射免疫法相媲美，而且化学发光免疫法的准确性、精密度和试剂盒的有效期等方面均优于放射免疫法。由于化学发光免疫法是以化学发光剂作为标记物进行定量检测，所以其试剂具有稳定和无毒性的优点。本实验使用的全自动化学发光仪可以直接对血清标本进行采样，处理和检测，标本可以随到随测，短时间内出结果，较放免法大大缩短了时间，能充分满足临床的需要。因此本文认为，化学发光免疫法可广泛应用于临床项目的检测。    

      参考文献    

      ［1］陶义训主编．免疫学和免疫学检验．第二版．北京：人民卫生出版社，1997∶174   
      ［2］章谷生.发光分析和发光免疫技术．余传霖等主编．现代医学免疫学．上海：上海医科大学出版社，1999∶716   
      ［3］张丽民．化学发光标记及发光免疫分析．基础医学与临床.1995；15(4)∶247